تحليل hct الهيماتوكريت – مراجعة لطرق التحليل المختلفة
المقدمة
توضح هذه المقالة مزايا وعيوب الطرق المختلفة لقياس الهيماتوكريت من خلال مناقشة ما يلي:
- مكونات الدم الكامل
- مؤشرات لقياس الهيماتوكريت
- تقنيات القياس
1. Microhematocrit
2. العد الكامل لخلايا الدم
3. الموصلية في أجهزة تحليل غازات الدم
4. حساب الهيماتوكريت - مقارنة بين التقنيات المختلفة
ستتبع هذه المقالة بمقال آخر يصف الطرق المختلفة لتحديد الهيموجلوبين.
مكونات الدم الكامل
يتكون الدم الكامل من كريات الدم الحمراء (خلايا الدم الحمراء أو كرات الدم الحمراء التي تشارك في نقل الأكسجين) والصفائح الدموية وخلايا الدم البيضاء (خلايا الدم البيضاء أو كرات الدم البيضاء المشاركة في الدفاع المناعي للجسم)، يتم تعليق الخلايا في الوسط المائي للبلازما.
تشكل كريات الدم الحمراء الغالبية العظمى من الخلايا في دم الأفراد الأصحاء، حيث تحتوي كريات الدم الحمراء على الهيموجلوبين (Hb)، الذي يعطي الدم لونه الأحمر والذي يتمتع بقدرات الارتباط بالأكسجين، تتكون البلازما بشكل أساسي من الماء (حوالي 93٪) ولكن أيضًا من الأملاح والبروتينات والدهون المختلفة بالإضافة إلى المكونات الأخرى، مثل الجلوكوز.
1. عينة الدم الكامل بالطرد المركزي
تعريف الهيماتوكريت (الهيماتو من الكلمة اليونانية haima = الدم ؛ Crit من اليونانية krinein = للفصل) هو نسبة حجم خلايا الدم الحمراء المكدسة إلى الحجم الكلي للدم، وبالتالي يُعرف أيضًا باسم حجم الخلايا المعبأة، أو PCV.
يتم الإبلاغ عن الهيماتوكريت كنسبة مئوية في الأفراد البالغين الأصحاء، تتكون خلايا الدم الحمراء تقريبًا 40-48٪، في حين قد تصل نسبة الهيماتوكريت عند الأطفال حديثي الولادة إلى 60٪.
تشكل الطبقة الموجودة بين كرات الدم الحمراء والبلازما، طبقة الغلاف المصافي، تقريبًا 1٪، يتكون من كرات الدم البيضاء والصفائح الدموية وبالتالي لا ينبغي حسابه كجزء من حجم الخلية المعبأة.
العلاقة بين الهيماتوكريت والهيموجلوبين
فيما يلي ملخص للكميات / الاختصارات ذات الصلة عند مناقشة الهيماتوكريت:
- Hct: الهيماتوكريت (٪ أو جزء الحجم)
- c tHb: تركيز الهيموغلوبين الكلي (جم / ديسيلتر أو جم / لتر أو مليمول / لتر)
- كرات الدم الحمراء: خلايا الدم الحمراء (كرات الدم الحمراء) (× 10 12 / لتر)
- MCV: متوسط حجم الخلية (fL)
- MCHC: متوسط تركيز الهيموجلوبين العضلي (٪ ، جم / لتر أو مليمول / لتر)
في الظروف العادية توجد علاقة خطية بين الهيماتوكريت وتركيز الهيموجلوبين ( c tHb)، حيث أظهرت دراسة تجريبية أنه يمكن التعبير عن العلاقة على النحو التالي:
Hct (٪) = (0.0485 × c tHb (مليمول / لتر) + 0.0083) × 100 |
يمكن أيضًا تقدير الهيماتوكريت من قياسات متوسط حجم الخلية (MCV) أو متوسط تركيز الهيموجلوبين في الجسم (MCHC):
Hct (٪) = MCV × RBC × 0.1 |
Hct (٪) = c tHb × 100 MCHC |
مؤشرات لقياس كبد الدم
قد يتم طلب قياسات الهيماتوكريت عند الاشتباه في أن المريض مصاب بفقر الدم أو يعاني من الجفاف أو النزيف أو غير ذلك من الحالات الطبية والجراحية.
الهيماتوكريت منخفض
يعكس انخفاض الهيماتوكريت عددًا منخفضًا من خلايا الدم الحمراء المنتشرة وهو مؤشر على انخفاض القدرة على حمل الأكسجين أو زيادة السوائل، تتضمن أمثلة الحالات التي تسبب فقر الدم المنخفض:
- نزيف داخلي أو خارجي – نزيف
- مضاعفات الفشل الكلوي المزمن – أمراض الكلى
- فقر الدم الخبيث – نقص فيتامين ب 12
- انحلال الدم – يرتبط بتفاعلات نقل الدم
يمكن العثور على انخفاض الهيماتوكريت في أمراض المناعة الذاتية وفشل نخاع العظام.
ارتفاع الهيماتوكريت
قد يعكس ارتفاع الهيماتوكريت زيادة مطلقة في عدد كريات الدم الحمراء، أو انخفاض في حجم البلازما، في حالات مثل:
- الجفاف الشديد – على سبيل المثال في حالة الحروق أو الإسهال أو الاستخدام المفرط لمدرات البول
- كثرة الكريات الحمر – إنتاج مفرط لخلايا الدم الحمراء
- كثرة الحمر الحقيقية – زيادة غير طبيعية في خلايا الدم
- داء ترسب الأصبغة الدموية – اضطراب وراثي في استقلاب الحديد
يستخدم الهيماتوكريت المرتفع أيضًا كمؤشر على الإفراط في تناول الإريثروبويتين الخارجي (EPO)، الذي يحفز إنتاج خلايا الدم الحمراء، يمكن للرياضيين تحسين أدائهم بشكل مصطنع من خلال تعزيز القدرة على حمل الأكسجين باستخدام EPO.
تعتبر قيم الهيماتوكريت المرتفعة شائعة عند الأطفال حديثي الولادة وخاصة الأطفال الخدج، يصل الهيماتوكريت عند الرضع إلى مستوى الهيماتوكريت البالغ بحوالي ثلاثة أشهر من العمر.
غالبًا ما تتطلب الظروف التي تؤدي إلى قيم منخفضة للهيماتوكريت، مثل النزيف، قياسات مستمرة للهيماتوكريت وقرارات سريعة بشأن عمليات نقل الدم، إذا تم قياس الهيماتوكريت فور حدوث نزيف حاد، فستكون القيمة طبيعية حتى يتم تصحيح انخفاض حجم الدم عن طريق تحولات السوائل في الأوعية الدموية.
تقنيات القياس
يقدم هذا القسم وصفًا تقنيًا للتقنيات الأكثر استخدامًا لقياس الهيماتوكريت:
- تحديد الهيماتوكريت عن طريق الطرد المركزي
- حساب الهيماتوكريت من العد الكامل لخلايا الدم (CBC)
- تحديد الهيماتوكريت عن طريق الموصلية
- حساب الهيماتوكريت من c tHb
1. ميكرويماتوكريت
الطريقة المرجعية التي أوصت بها NCCLS لتحديد حجم الهيماتوكريت أو حجم الخلية المعبأة (PCV) هي الطرد المركزي.
الطريقة [4]:
الهيماتوكريت (PCV) هو قياس نسبة الحجم الذي تشغله خلايا الدم الحمراء إلى حجم الدم الكامل، يتم سحب عينة الدم في أنبوب شعري وطرد مركزي، ومن ثم يمكن قياس النسبة والتعبير عنها في صورة كسر عشري أو نسبة مئوية.
المواد:
- الدم الكامل من ثقب الجلد المتدفق بحرية أو الدم الوريدي أو الشرياني المضاد للتخثر (EDTA أو الهيبارين)
- أنابيب شعرية زجاجية بقطر ضيق
- مركب مانع للتسرب (إذا لم تكن الشعيرات الدموية ذاتية الختم)
- جهاز طرد مركزي دقيق ذو قوة طرد مركزي نسبية قصوى تبلغ 10-15000 × جم ، والتي يجب الوصول إليها في غضون 30 ثانية [4]
- جهاز قراءة الرسوم البيانية
إجراء:
- تمتلئ الأنابيب الشعرية بالقوى الشعرية. مطلوب ما لا يقل عن اثنين من الشعيرات الدموية لضمان التوازن في أجهزة الطرد المركزي. من المهم أن تكون الأنابيب محكمة الغلق.
- بعد خمس دقائق من الطرد المركزي ، يمكن قياس الهيماتوكريت بينما لا تزال الأنابيب في وضع أفقي. يظهر عمود مميز من كريات الدم الحمراء المعبأة في أحد طرفي الأنبوب الشعري (الشكل 2). يتبع كريات الدم الحمراء المعبأة أولاً طبقة عكر صغيرة – طبقة الغلاف الجامح – ثم عمود واضح من البلازما (الشكل 2). يتم تقدير الهيماتوكريت عن طريق حساب نسبة عمود كريات الدم الحمراء المعبأة إلى الطول الإجمالي للعينة في الأنبوب الشعري ، مقاسة بجهاز قراءة رسومي.
- يجب إجراء القياس في غضون 10 دقائق لتجنب دمج الطبقات.
محددات:
- أظهرت الدراسات أن الهيماتوكريت المغزول يعطي قيمًا تقريبًا. 1.5-3.0٪ عالية جدًا بسبب احتباس البلازما في طبقة كرات الدم الحمراء. في حالة وجود أنواع غير طبيعية من كرات الدم الحمراء ، يمكن أن يكون هذا التحيز أكبر ، حيث يتم احتجاز المزيد من البلازما [5]. انظر أيضًا الجدول الأول.
2. العد الكامل لخلايا الدم (CBC)
في مختبرات أمراض الدم ، تعد أجهزة تحليل عدد الخلايا الأوتوماتيكية التي تقيس معلمات متعددة هي الأكثر استخدامًا.
الطريقة:
يتم تحديد الهيماتوكريت بشكل غير مباشر من متوسط حجم وعدد كرات الدم الحمراء. الطريقة المرجعية هي مبدأ مقاومة كولتر [6] وهي موصوفة أدناه.
المواد:
- أنابيب عينات تحتوي عادة على 3-5 مل EDTA من الدم المضاد للتخثر
إجراء:
- يتم تخفيف عينة الدم بالكامل تلقائيًا بمحلول متساوي التوتر قبل التحليل.
- يُدفع الدم المخفف من خلال فتحة بها قطبان كهربائيان موضوعان على جوانب متقابلة (الشكل 3).
- من خلال تطبيق تيار مستمر بين القطبين ، تكون المعاوقة ثابتة حتى تمر خلية الدم عبر الفتحة
- بسبب الخصائص غير الموصلة لغشاء خلايا الدم الحمراء ، تزداد المقاومة الكهربائية في كل مرة تمر فيها كريات الدم الحمراء عبر الفتحة.
- يرتبط التغيير في الجهد بين الأقطاب الكهربائية بحجم كريات الدم الحمراء المارة. علاوة على ذلك ، يتم حساب كرات الدم الحمراء التي مرت عبر الفتحة. يتم اشتقاق الهيماتوكريت من متوسط حجم الخلية وعدد كريات الدم الحمراء وعامل التخفيف.
محددات:
- عند وجود عدد مرتفع من الخلايا الشبكية أو كرات الدم البيضاء، يمكن أن تؤدي قرارات الهيماتوكريت باستخدام أجهزة تحليل الدم إلى حساب القيم المرتفعة بشكل خاطئ، لأن أحجام الخلايا الأعلى لهذه الخلايا ستتداخل مع عدد خلايا الدم الحمراء وحساب الهيماتوكريت، انظر أيضًا الجدول الأول.
3. الموصلية على أجهزة تحليل غازات الدم
في الاختبارات في نقطة الرعاية، غالبًا ما تُستخدم أجهزة تحليل غازات الدم التي تقيس معاملات STAT المتعددة، تحدد بعض أجهزة تحليل غازات الدم الهيماتوكريت عن طريق قياس الموصلية التي يتم تصحيحها لتركيزات الأيونات الموصلة في العينة.
المواد:
- الحقن أو الشعيرات الدموية التي تحتوي على الدم الشرياني أو الوريدي الهيبارين
طريقة:
- الموصلية هي قدرة المحلول على نقل (توصيل) الكهرباء، سيزداد التيار الكهربائي بما يتناسب مع عدد الأيونات (أو الجسيمات المشحونة) الموجودة في المحلول، وشحنتها الكهربائية وقدرتها على الحركة، أي مدى سهولة تحرك الأيونات في المحلول، تعتمد حركة أيون في المحلول أيضًا على عدد الخلايا (والحجم والشكل) المعلقة في المحلول.
- تتمتع كل من كريات الدم الحمراء والبلازما بخصائص فيزيائية كهربية مميزة. يكون غشاء كريات الدم الحمراء عازلًا كهربائيًا ، ويرجع ذلك أساسًا إلى محتواه من الدهون ، بحيث يبدو بشكل أساسي غير موصل.
- البلازما موصلة إلى حد ما بسبب محتواها من الإلكتروليتات والبروتينات المشحونة ؛ المساهم الرئيسي في توصيل البلازما هو Na + ، حيث يكون التركيز في بلازما الدم البشري تقريبًا. 140 مليمول / لتر.
- نتيجة لذلك، توجد علاقة عكسية بين التوصيل الكهربائي والهيماتوكريت في الدم عند أخذ تركيز الجسيمات المشحونة في الاعتبار.
هناك ثلاثة عوامل إلى جانب عدد كرات الدم الحمراء ضرورية لتحديد قيمة الهيماتوكريت عند استخدام طريقة تعتمد على قياس التوصيل الكهربائي:
- الشوارد
- درجة الحرارة
- البروتينات
تسمح معظم أجهزة تحليل غازات الدم بهذه المتغيرات على النحو التالي:
- تركيز الإلكتروليتات: يتم تحديد ذلك من خلال قياس أيون واحد أو أكثر، نظرًا لأن الصوديوم هو المنحل بالكهرباء الأساسي في البلازما، فإن هذا هو الأيون الأكثر أهمية لقياسه واستخدامه في حساب الهيماتوكريت.
- للتغير في درجة الحرارة تأثير كبير على التوصيل لأن الدم له معامل حرارة مرتفع، يتم ضبط غرفة القياس في أجهزة تحليل غازات الدم بالحرارة ويتم تسخين عينة الدم مسبقًا قبل القياس ؛ وبالتالي لا توجد مساهمة من تغير درجة الحرارة.
- يُفترض أن تركيز البروتين في البلازما ثابتًا لدى الأشخاص الأصحاء، لذلك يتم تضمين تعويض ثابت لهذا في حساب الهيماتوكريت في أجهزة تحليل غازات الدم.
محددات:
- في المرضى الذين يعانون من الأسمولية البلازمية غير الطبيعية، على سبيل المثال المرضى الذين يعالجون بموسعات البلازما أو مخففات الدم أو العلاج بالتسريب الشامل، لم يعد تركيز البروتين ثابتًا ويعطي تحديد الهيماتوكريت قيمًا منخفضة بشكل خاطئ [8 ، 9]. تقدم بعض أجهزة تحليل غازات الدم تصحيحًا لهذا التحيز [10،11،12]. انظر أيضًا الجدول الأول.
4. حساب الهيماتوكريت من الهيموجلوبين
نظرًا لوجود علاقة خطية بين الهيموغلوبين ( c tHb) والهيماتوكريت كما تم وصفه سابقًا، فمن الممكن حساب الهيماتوكريت على أجهزة التحليل التي تقيس الهيموجلوبين، عند إجراء هذا التحويل، يجب أخذ عاملين بعين الاعتبار:
- الجودة التحليلية لقياس c tHb
- دقة المعادلة التي تحول المعلمتين
عادةً ما يكون قياس c tHb من معظم أجهزة التحليل عالية الجودة موثوقًا به ؛ ومع ذلك، فإن المعادلات المستخدمة لحساب الهيماتوكريت تختلف من محلل إلى محلل. يستخدم بعض المحللين معادلة تم العثور عليها تجريبياً [2،13] بينما يستخدم البعض الآخر عامل تحويل تقريبي 3 [14،15].
مثال:
تركيز الهيموجلوبين (جم / ديسيلتر) |
معادلة التحويل | ٪ Hct | مرجع |
15* | Hct (٪) = (0.0485 × c tHb (مليمول / لتر) + 0.0083) × 100 | 45.98 | [2] |
15 | Hct (٪) = 2.8 × c tHb (جم / ديسيلتر) + 0.8 | 42.80 | [13] |
15 | Hct (٪) = c tHb (g / dL) / 0.34 | 44.12 | [16] |
15 | Hct (٪) = 2.941 × c tHb (جم / ديسيلتر) | 44.12 | [14،15] |
الجدول الأول: تأثير عوامل التحويل المختلفة على نسبة Hct .
* عامل التحويل: g / dL × 0.62058 = mmol / L
محددات:
- يُفترض عمومًا أن التحويل من الهيموغلوبين إلى الهيماتوكريت يكون واضحًا لأن معظم طرق قياس c tHb تعتبر دقيقة إلى حد ما ومع ذلك ، يستخدم محللون مختلفون عوامل تحويل مختلفة ، مما قد يضر بمصداقية نتيجة الهيماتوكريت. غالبًا ما يتم استخدام الهيماتوكريت والهيموغلوبين بالتبادل ؛ ومع ذلك ، فقد أظهرت دراسات مختلفة أن المعلمتين غير قابلة للمقارنة ، ولكن لهما تطبيقات منفصلة [15 ، 17 ، 18 ، 19].
مقارنة تقنيات القياس
جميع تقنيات القياس لتحديد الهيماتوكريت لها مزايا وعيوب. يوفر الجدول التالي نظرة عامة سهلة على الطرق الموضحة. تم العثور على المزايا / العيوب المذكورة جميعًا من خلال مراجعة الأدبيات ، أي لم يتم تحديد الأولويات وفقًا للأهمية.
طريقة | مزايا |
ميكرويماتوكريت |
|
العد الكامل لخلايا الدم |
|
التوصيل |
|
الحساب من c tHb |
|
الجدول الثاني أ. مزايا الطرق المختلفة لقياس الهيماتوكريت.
طريقة | سلبيات |
ميكرويماتوكريت |
|
العد الكامل لخلايا الدم |
|
التوصيل |
|
الحساب من c tHb |
|
الجدول الثاني ب. عيوب الطرق المختلفة لقياس الهيماتوكريت.
نقاش
عند استخدام الهيماتوكريت لتقييم فقر الدم والقدرة على حمل الأكسجين، يجب مراعاة مزايا وعيوب كل طريقة بعناية. بالإضافة إلى ذلك، يجب تحديد الاحتياجات السريرية والتحليلية لأي مجموعة من المرضى.
يعتبر الهيماتوكريت تقليديا معلمة روتينية لمختبر أمراض الدم ومع ذلك، فإن قياس الهيماتوكريت كمعامل STAT في إعداد POC هو الأفضل من نواح كثيرة، لأن هذا سيوفر الوقت في المواقف الحرجة وتجنب مشاكل نقل العينات، تقدم بعض أجهزة تحليل غازات الدم هذا الاحتمال، إما عن طريق قياس الهيماتوكريت عن طريق الموصلية أو عن طريق حساب الهيماتوكريت من c tHb.
يستخدم الهيموغلوبين أيضًا لتقييم فقر الدم في المختبر وكمعامل STAT في أجهزة تحليل الاختبارات في نقطة الرعاية. ستتم مناقشة طرق قياس الهيموجلوبين المختلفة وتطبيقاتها في مقال آخر.
الخاتمة
كل من الطرق المخبرية التقليدية لقياس أو حساب الهيماتوكريت في الاختبارات في نقطة الرعاية لها حدود، يجب أن تكون الأساليب المستخدمة خارج المختبر بديهية للمستخدمين دون أن تستغرق معالجة العينات وقتًا طويلاً.
قد لا تكون الطرق المناسبة لبيئة البالغين مناسبة لبيئة حديثي الولادة بسبب قيود حجم العينة، بعض الطرق ليست مناسبة في تطبيقات معينة بسبب المشاكل المرتبطة بسوائل توسيع الحجم أو خلايا الدم الحمراء ذات الحجم أو الشكل غير الطبيعي.
يمكن أن يكون لهذه القيود آثار سريرية مهمة ويجب النظر فيها بعناية كما هو موضح في هذه المقالة.